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[发明专利]筛选和分离外源基因表达细胞的载体系统-CN201010586592.1无效
发明人：孙美艺;刘庆军;韩化敏;刘小立 -专利权人：北京表源生物技术有限公司
申请日： 2010-12-13 - 公布日： 2012-07-04 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明涉及一种筛选和分离外源基因表达细胞的载体系统，其包含：具有携带生物素化酶基因表达盒的第一表达载体，具有携带生物素化酶底物与跨膜蛋白基因表达盒的第二表达载体，以及位于第一表达载体和/或第二表达载体上的目的基因表达盒本发明还涉及使用上述表达外源基因载体系统用于筛选和分离外源基因表达细胞的方法。本发明所述的表达外源基因的载体系统可快速、简便地建立、筛选和分离表达外源基因的细胞，用于研发与临床应用。
筛选分离基因表达细胞载体系统

[发明专利]双表达盒的表达载体及其制备方法与应用-CN200910076381.0无效
发明人：刘金华;刘芹防;马婧姣;蒲娟;傅光华;毕玉海 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2009-01-14 - 公布日： 2009-06-24 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明公开了一种双表达盒的表达载体及其制备方法与应用。该表达载体是一种环状载体，包含原核复制起点、两个真核复制起点、筛选标记基因和两个外源基因表达盒；所述两个外源基因表达盒分别为外源基因表达盒1和外源基因表达盒2；所述外源基因表达盒1自上游至下游依次含有两个转录方向相同的启动子、连接片段1和多聚腺苷酸加尾信号，所述连接片段1含有EcoRV识别序列；所述外源基因表达盒2自上游至下游依次含有两个转录方向相同的启动子、连接片段2和多聚腺苷酸加尾信号，所述连接片段2含有StuI识别序列本发明的pDP-EX-vector含有两个外源基因表达盒、两个真核复制起点，可以在表达T抗原的细胞中大量增值，从而提高蛋白表达的水平，具有很好的应用前景。
表达载体及其制备方法应用

[发明专利]去除转基因植物中阶段性作用外源基因的方法-CN200410053873.5无效
发明人：卫志明;刘海坤;杨超 -专利权人：中国科学院上海生命科学研究院
申请日： 2004-08-20 - 公布日： 2006-02-22 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于转化植物并去除转基因作物中阶段性外源基因的方法和构建物，所述构建物含有(a)LoxP元件；(b)外源基因表达盒和/或筛选标记基因表达盒；(c)Cre基因表达盒，其中所述Cre表达盒的启动子是用该构建物转化的植物在热激条件下会将LoxP元件之间的外源基因去除，从而减少转基因作物中外源基因的潜在危害。
去除转基因植物阶段性作用基因方法

[发明专利]一种新型酿酒酵母表达体系及其构建方法-CN201810068015.X有效
发明人：鲍晓明;徐丽丽;邱晨曦;李洪兴;易勇;张继祥;付传超;王栋 -专利权人：齐鲁工业大学;山东圣琪生物有限公司
申请日： 2018-01-24 - 公布日： 2021-05-18 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明利用RNA聚合酶I在rDNA基因转录方面的高效作用，用rDNA基因启动子启动外源或内源基因表达，构建了一种新型酿酒酵母表达体系。一种酿酒酵母新型表达体系及其构建方法，包括一种新型表达载体，所述载体从5’到3’依次包括YEplac195质粒骨架、外源基因表达盒、筛选标记基因表达盒；所述外源基因表达盒自上游至下游依次包括rDNA启动子、内部核糖体进入位点（Internal ribosome entry site，IRES）序列、外源基因表达框、poly(T)序列、rDNA终止子；所述筛选标记基因表达盒包括启动子、筛选标记基因、转录终止子本发明的表达系统可实现外源基因在酿酒酵母中的高效表达，对酿酒酵母产品开发及基础理论研究具有重要的意义，同时对于酿酒酵母中RNA聚合酶I介导的调控机制和rRNA合成机制的研究也具有重要的意义。
一种新型酿酒酵母表达体系及其构建方法

[发明专利]提高转基因昆虫细胞表达外源基因水平的方法-CN200810025299.0无效
发明人：贡成良;曹广力;薛仁宇;周文林;沈卫德 -专利权人：苏州大学
申请日： 2008-04-30 - 公布日： 2008-09-24 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高昆虫转基因细胞表达外源基因的方法，将在昆虫细胞内具有活性的启动子控制的新霉素抗性基因表达盒、增强子元件和外源基因表达盒通过基因操作克隆进以转座子piggyBAC因子为基础的带有报告基因的载体，然后与表达转座酶的辅助质粒混合转染昆虫细胞系，通过G418的分段筛选获得转基因昆虫细胞。该转基因细胞通过细胞克隆技术，结合外源基因表达水平的实际检测获得外源基因高水平表达的工程细胞。本发明方法实现了转基因昆虫细胞高水平持续表达外源基因，表达产物无杆状病毒污染，生物安全性高，后加工完善，天然性好。
提高转基因昆虫细胞表达基因水平方法

[发明专利]一种曲霉表达载体及其应用-CN200810240800.5无效
发明人：金城;欧阳浩淼;陈晓敏 -专利权人：中国科学院微生物研究所
申请日： 2008-12-23 - 公布日： 2010-06-30 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明公开了一种曲霉表达载体及其应用。该表达载体，包含原核复制起点、筛选标记基因和外源基因表达盒；所述外源基因表达盒从上游至下游依次包括几丁质酶基因启动子、外源基因和终止子。本发明还公开了一种生产蛋白的方法，该方法是将所述的表达载体导入曲霉获得重组菌，培养所述重组菌生产目的蛋白。本发明的曲霉表达载体能够使外源基因在烟曲霉表达，利用曲霉生产目的蛋白。本发明的曲霉表达载体为烟曲霉基因蛋白功能的研究提供了一个很好的表达系统。
一种曲霉表达载体及其应用

[发明专利]一种酿酒酵母基因表达系统及其构建与应用-CN201510005035.9有效
发明人：张梁;范贺超;高芝;李由然;石贵阳;顾正华;李赢;丁重阳;何冬旭 -专利权人：江南大学
申请日： 2015-01-06 - 公布日： 2018-08-14 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：一种整合型酿酒酵母基因表达系统，包括一种表达载体，所述表达载体从5’‑3’依次包括以下可操作性元件：pMD19‑Tsimple质粒骨架、rDNA同源重组序列、外源基因表达盒和筛选标记基因表达盒；所述外源基因表达盒自上游至下游依次包括启动子、外源基因插入酶切位点以及转录终止子；所述筛选标记基因表达盒包括启动子、抗生素抗性基因、转录终止子。本发明的表达载体可实现在酿酒酵母中的整合型稳定表达，对酿酒酵母的基础理论研究及产品开发具有重要的意义。
一种酿酒酵母基因表达系统及其构建应用

[发明专利]一种删除转基因水稻精米中的外源基因的表达载体及其应用-CN201110339472.6有效
发明人：潘刚;张春娇;王宁;程方民 -专利权人：浙江大学
申请日： 2011-11-01 - 公布日： 2012-03-28 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于删除转基因水稻精米中的外源基因的表达载体，包括原始载体以及插入原始载体的重组序列，所述的重组序列由两端的LoxP-FRT元件、中间的外源目的基因表达盒和Cre基因或FLP基因表达盒组成，所述Cre基因或FLP基因表达盒的启动子为胚乳特异性启动子。本发明还公开了一种利用所述的表达载体删除转基因水稻精米中的外源基因的方法，将获得的表达载体转入水稻细胞，培育生成转基因水稻植株。本发明方法获得的转基因水稻即能达到抗虫和(或)抗除草剂等目的，而在胚乳即精米中又没有外源目的基因，解决了其食用安全性问题。
一种删除转基因水稻精米中的基因表达载体及其应用

[发明专利]四环素可控内皮细胞特异性可视化表达目的基因的系统-CN201110146131.7无效
发明人：杨述林;李和刚;桂端;李奎 -专利权人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
申请日： 2011-06-01 - 公布日： 2011-12-21 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明公开了一种四环素可控内皮细胞特异性可视化表达目的基因的系统。本发明提供了用于在猪血管内皮细胞中表达外源蛋白的编码基因的表达盒组合物，由表达盒甲和表达盒乙组成；表达盒甲和表达盒乙均为双链DNA；表达盒甲自上游至下游依次包括ICAM-2启动子、反式四环素转录激活蛋白的编码基因和终止序列；表达盒乙自上游至下游依次包括TRE调控元件、IRES2、荧光标记蛋白的编码基因和终止序列。本发明提供的系统可用于时空特异性表达外源蛋白。空间特异性是指控制外源蛋白在血管内皮细胞内特异表达。时间特异性是指通过强力霉素控制外源蛋白在特定时间表达。
四环素可控内皮细胞特异性可视化表达目的基因系统

[发明专利]一种杆状病毒载体及其在昆虫细胞中制备rAAV的应用-CN202210528997.2有效
发明人：请求不公布姓名 -专利权人：睿征医药科技（武汉）有限公司
申请日： 2022-05-16 - 公布日： 2023-06-27 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，具体公开了一种杆状病毒载体及其在昆虫细胞中制备rAAV的应用，该杆状病毒载体包含外源基因表达盒与稳定序列，所述稳定序列位于距离所述外源基因表达盒的5kb以内，所述稳定序列为CNE本发明将CNE(或NAE)序列构建至重组杆状病毒载体上的外源基因表达盒附近，使得携带产生AAV所必需的功能蛋白表达盒或ITR核心表达元件等外源基因表达盒的重组杆状病毒感染昆虫细胞，在连续传代多代后，重组杆状病毒和
一种杆状病毒载体及其昆虫细胞制备 raav 应用

[发明专利]一株能够利用木糖的酵母Candidajeffriesii的表达系统-CN201510006229.0有效
发明人：张梁;范贺超;高芝;李由然;石贵阳;顾正华;李赢;丁重阳;何冬旭 -专利权人：江南大学
申请日： 2015-01-06 - 公布日： 2018-03-20 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及一株能够利用木糖的酵母Candida jeffriesii的表达系统，包括一种表达载体，从5’‑3’依次可操作性地连接有以下元件pMD19‑Tsimple质粒骨架、rDNA同源重组序列、外源基因表达盒和筛选标记基因表达盒；外源基因表达盒自上游至下游依次包括启动子、外源基因插入酶切位点以及转录终止子；筛选标记基因表达盒包括启动子、抗生素抗性基因、转录终止子。本发明的表达载体可实现在Candida jeffriesii中的整合型稳定表达，对木糖利用酵母Candida jeffriesii的基础理论研究及产品开发具有重要的意义。
能够利用酵母 candida jeffriesii 表达系统

[发明专利]一种乳酸菌双基因表达盒及其构建方法和应用-CN201611235844.X在审
发明人：艾连中;熊智强;王光强;夏永军;张汇 -专利权人：上海理工大学
申请日： 2016-12-28 - 公布日： 2017-03-22 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明提供了一种乳酸菌双基因表达盒，用于插入外源基因后在乳酸菌中对外源基因进行表达，包括第一表达盒和第二表达盒，该第一表达盒包含pldh启动子及第一终止子，第二表达盒包含p23启动子及第二终止子；本发明还提供了含有该乳酸菌双基因表达盒的表达载体及该表达载体的构建方法利用本发明提供的含有该乳酸菌双基因表达盒的表达载体，能够实现两个目的外源基因在乳酸菌中的共表达，使得干酪乳杆菌能够表达两种胆盐水解酶并表现出具有胆盐降解活力。
一种乳酸菌基因表达及其构建方法应用

[发明专利]一种诱导外源基因在革兰氏阴性菌中表达的系统及其应用-CN201610171174.3有效
发明人：陈国强;赵晗;张浩千;兰陆红 -专利权人：清华大学;蓝晶（北京）生物科技有限责任公司
申请日： 2016-03-23 - 公布日： 2018-06-22 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明公开了一种诱导外源基因在革兰氏阴性菌中表达的系统及其应用。本发明提供了一种在革兰氏阴性菌中表达外源基因的方法，为为用含有阻遏蛋白表达盒和RNA聚合酶表达盒的调控元件调控外源基因表达盒在革兰氏阴性菌中表达；本发明的实验证明，本发明提供革兰氏阴性菌中高效诱导表达系统由特定聚合酶和其对应的启动子两部分构成，在革兰氏阴性菌中诱导表达聚合酶、启动子和驱动的外源基因，可实现外源基因的高效大量表达，实现工业生产中具备简化提取步骤、提高蛋白表达量、降低生产成本的重要意义，具有广泛的应用前景，具有广阔的商业利用价值
革兰氏阴性菌诱导外源基因外源基因表达盒聚合酶启动子外源基因表达盒表达外源基因应用蛋白表达量表达系统调控元件高效诱导商业利用诱导表达重要意义阻遏蛋白驱动调控

[发明专利]猪源启动子蛋白表达载体及其构建方法与应用-CN201010261045.6有效
发明人：崔尚金;刘芹防;刘珊珊;张超范 -专利权人：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
申请日： 2010-08-24 - 公布日： 2011-01-19 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了猪源启动子蛋白表达载体及其构建方法与应用。本发明表达载体为环状，包含原核复制起点、真核复制起点、筛选标记基因和外源基因表达盒，所述外源基因表达盒自上游至下游依次由转录启动子、连接片段和多聚腺苷酸加尾信号组成；所述转录启动子是MLP6启动子。本发明表达载体可在猪类细胞中高效表达外源蛋白，因含有一个真核复制起点，可在表达T抗原的细胞中大量增值，从而提高蛋白表达水平。本发明利用同源重组构建表达外源基因的重组载体，避免了传统的酶切，连接等环节，比传统的连接过程省略了2-3个步骤。使用本发明载体构建表达外源基因的重组载体的过程简便、快速、经济、高效，可以快速完成大量外源基因的表达载体的构建。
启动子蛋白表达载体及其构建方法应用

[发明专利]树干毕赤酵母基因表达系统及其构建与应用-CN201510005584.6有效
发明人：张梁;范贺超;高芝;李由然;石贵阳;顾正华;李赢;丁重阳;何冬旭 -专利权人：江南大学
申请日： 2015-01-06 - 公布日： 2017-11-21 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及树干毕赤酵母基因表达系统及其构建与应用，包括一种新型表达载体，其为环状，从5’‑3’依次可操作性地连接有以下元件pMD19‑Tsimple质粒骨架、rDNA同源重组序列、外源基因表达盒和筛选标记基因表达盒；所述外源基因表达盒自上游至下游依次包括启动子、外源基因插入酶切位点以及转录终止子；所述筛选标记基因表达盒包括启动子、抗生素抗性基因、转录终止子。本发明的表达载体可实现在树干毕赤酵母中的整合型稳定表达，对树干毕赤酵母的基础理论研究及产品开发具有重要的意义。
树干酵母基因表达系统及其构建应用

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